标准集团：GB/T 24800.5-2009 化妆品中呋喃妥因和呋喃唑酮的测定

5 测定步骤

5.1 样品处理

称取化妆品试样0. 5 g（精确到0.001g)，置于25 mL具塞比色管中，加入15 mL提取剂（3. 6)，充分混匀，在超声波清洗器中超声提取20 min，然后用去离子水定容至25 mL,混匀。取约10 mL上述溶液于离心管中，以5000 r/min高速离心20 min，取上清液，经0.45 μm有机过滤膜过滤，滤液供液相色谱测定用。

5.2 测定

5.2.1 色谱条件

5.2.1.1 色谱柱：ODS C18柱：250mm×4.6mm,粒径5μm，或相当者。

5.2.1.2 流动相：乙腈加0.4％乙酸水溶液（30+70,v/v)。

5.2.1.3 流速：1.0mL/min。

5.2.1.4 检测波长：365nm。

5.2.1.5柱温：25℃。

5.2.1.6 进样量：10μL。

5.2.2 标准工作曲线绘制

分别移取10μL浓度为0.2μg/mL,0.5μg/mL,1.0μg/mL,5.0μg/mL,10 μg/mL,20μg/mL的标准工作溶液，按色谱条件（5. 2. 1)进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。

标准物质色谱图参见附录八的图A.1,

5.2.3 试样测定

用微量注射器准确吸取10μL处理后的样品溶液（5. 1)注入液相色谱仪，按色谱条件（5. 2. 1)进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，由色谱峰的峰面积可从标准曲线上求出相应的色谱峰浓度。样品溶液中的呋喃妥因和呋喃唑酮的响应值均应在仪器测定的线性范围之内。呋喃妥因和呋喃唑酮含量高的试样可取适量试样溶液用流动相稀释后进行测定。

5.2.4 定性确认

液相色谱仪对样品进行定性测定，进行样品测定时，如果检出呋喃妥因和呋喃唑酮的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的紫外吸收图谱与标准品的紫外吸收图谱相一致，则可初步确认样品中存在呋喃妥因和呋喃唑酮。必要时，阳性样品需用其他方法进行确认试验。

5.3 平行试验

按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。

5.4 空白试验

除不称取试样外，均按上述步骤进行。

6 结果计算

结果按式（1)计算（计算结果应扣除空白值）:

式中：

Xi一样品中呋喃妥因或呋喃唑酮的质量浓度，单位为毫克每千克（mg/kg);

Ci一标准曲线查得呋喃妥因或呋喃唑酮的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)

Vi一样品稀释后的总体积，单位为毫升（mL);